作者:薛华; 何生; 赵宗蓉; 黎介寿肿瘤浸润淋巴细胞抗瘤活性葡萄球菌肠毒素a流式细胞仪检测细胞毒活性肿瘤坏死因子til肝癌细胞株比色法测定培养上清液
摘要:目的探讨葡萄球菌肠毒素A(SEA)对肝癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)抗瘤活性的诱导作用.方法取5例手术切除肝癌标本,分离TIL,在SEA作用下进行培养.定时记数,了解其增殖情况.流式细胞仪检测其CD3、CD4、CD8表达情况,噻唑蓝(MTT)比色法测定其对HepG-2肝癌细胞株的细胞毒活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和γ-干扰素(IFN-γ)浓度.结果在SEA刺激下,2周TIL扩增100倍.1周后CD3+细胞占95%以上,CD8+细胞较CD4+细胞增殖更迅速.TIL细胞毒活性随培养逐渐增强.在培养的前10 d内,TIL产生大量的TNF-α峰值达(453.70±9.26) ng/L和IFN-γ,其峰值达(2 013.22±20.41) ng/L.结论 SEA可高效、迅速诱导肝癌TIL的抗瘤活性.
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