作者:彭宝岗; 梁力建; 谢斌辉; 陈祖兵; 何强树突状细胞mrna免疫研究疫苗诱导特异性细胞毒性t淋巴细胞抗肝癌肿瘤特异性ctl外周血单核细胞流式细胞计数仪dc细胞杀瘤活性细胞总数原发性肝癌rna转染体外刺激体外扩增肝癌组
摘要:目的探讨转染原发性肝癌(HCC)mRNA的树突状细胞(DC)能否诱导抗肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL).方法采用HCC患者外周血单核细胞(PBMC)体外刺激分化为DC细胞;从人肝癌HepG-2细胞和3例HCC患者的肝癌组织中体外扩增mRNA.以mRNA转染DC细胞,并与PBMC混合培养诱导扩增CTL.流式细胞计数仪检测培养细胞中CD3+、CD4+、CD8+细胞的比例.51Cr释放法测定CTL的杀瘤活性.结果经扩增人肝癌HepG-2 mRNA和2例AFP(+)患者的AFP(+)HCC mRNA诱导3周后,CD3+、CD8+细胞占淋巴细胞总数由诱导前的27.8%、26.5%、29.6%升高至89.3%、73.6%、86.8%;而经扩增AFP(-)HCC mRNA诱导3周后,CD3+、CD8+细胞占淋巴细胞总数由诱导前的25.4%升高至53.6%.转染HepG-2细胞和AFP(+)的患者HCC mRNA的DC诱导的CTL对HepG-2细胞杀瘤活性明显高于AFP(-)的患者,其杀瘤特性由MHC-I限制的CD8+T细胞所介导.结论 HCC mRNA体外转染DC能诱导肿瘤特异性CTL,可为肝癌的免疫治疗提供新的有效手段.
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