作者：郭明高; 杨甲梅; 李根丛; 苏长青; 钱其军...乙肝病毒腺病毒载体表达体外携带前s2蛋白人源化抗体抗体基因cho细胞蛋白质印迹
摘要：目的构建携带全长人乙肝病毒表面PRES2蛋白抗体基因的腺病毒载体,观察其在体外的表达.方法将全长2 570 bp人乙肝病毒表面PRES2蛋白抗体基因克隆入5型腺病毒穿梭质粒载体,在293细胞中重组产生重组腺病毒,体外感染CHO细胞,感染复数(Multiplicity of Infection Virus/Cell)为20,获得表达产物,并测定其亲和力.结果TCID50法测定重组腺病毒滴度为(2.1×1010)pfu/ml.病毒感染CHO细胞后,表达蛋白经蛋白质印迹分析证实为全长人源化抗体.抗体亲和力常数为(2.16±0.20)×108L/mol.结论全长人乙肝病毒表面PRES2蛋白抗体基因腺病毒载体成功构建和表达全长高亲和力人源化抗体,为乙型肝炎治疗提供了一个全新的途径.
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