作者：李琦; 于颖彦; 朱正纲; 刘炳亚; 纪玉宝; ...胃癌细胞株pdtc表达差异胃癌细胞增殖激活mkn45蛋白活性蛋白免疫印迹法蛋白质表达
摘要：目的探讨胃癌细胞株是否存在核转录因子(NF)-κB组成性激活及其对胃癌细胞增殖的影响机制.方法采用蛋白免疫印迹法(Western blot法)检测4株不同分化程度的胃癌细胞株NF-κB蛋白表达,比较4株胃癌细胞株中NF-κB蛋白质表达水平的差异.通过TransAMTMNF-κB p65试剂盒来比较不同胃癌细胞株中p65亚基的蛋白活性差异.选取活性较高细胞株,观察吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对NF-κB活性的影响;利用噻唑蓝(MTT)法,分别观察24、48、72h,PDTC对细胞增殖的影响.并采用流式细胞分析技术(FCM)检测细胞的凋亡情况.结果4株胃癌细胞株胞核中均存在NF-κB蛋白的表达,即存在NF-κB的组成性激活,且存在表达差异.活化的p50亚基在AGS细胞株中表达较低,在MKN28、MKN45、SGC-7901细胞株中表达较高;活化的p65亚基在MKN28、MKN45细胞株中表达较低,在AGS、SGC-7901细胞株中表达较高.经PDTC处理的实验组胃癌细胞,NF-κB的活性均被抑制(P＜0.01);同时细胞表现为不同程度的增长抑制(P＜0.01),FCM结果显示PDTC可诱导细胞的凋亡.结论胃癌细胞株中存在NF-κB的组成性激活,并在不同的细胞株中存在表达差异.抑制NF-κB的活性可明显抑制胃癌细胞的增殖,其机制与PDTC所诱导的细胞凋亡有关.
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