乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白1“饵”载体的构建及在酵母中的表达

作者：李越; 王琦; 成军; 武会娟肝炎病毒乙型肝类e抗原基因表达

摘要：目的 构建乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白1（ HBEBP1）真核表达载体,并在酵母细胞中进行表达.方法 以HepG2细胞来源的eDNA为模板,PCR扩增获得HBEBP1基因,克隆至pGEM-T载体.测序正确后双酶切pGEM-T-HBEBP1,回收目的片段并连接至酵母表达载体pGBKT7中,转化酵母菌AH109,在色氨酸缺陷型培养基（SD/-Trp/卡那霉素）上筛选阳性菌落后大量表达并提取重组蛋白,再进行SDS-PAGE和Western Blot分析.结果 成功构建酵母表达载体pGBKT7-HBEBP1,Western Blot结果显示重组蛋白表达产物存在于胞内,条带清晰、大小正确,相对分子质量约33 × 103.结论 利用真核表达载体在酵母细胞中成功表达HBEBP1蛋白,为研究HBEBP1蛋白的生物学功能奠定了基础.

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社