森林脑炎病毒prM-E蛋白在昆虫细胞中的表达及免疫活性测定

作者：刘艳丽; 司炳银; 户义; 张雨; 杨银辉; 祝...脑炎病毒亚组蜱传基因杆状病毒科表达的序列标记

摘要：目的为了表达森林脑炎病毒prM-E蛋白,为森林脑炎快速诊断试剂的研制奠定基础.方法经过RT-PCR扩增、重组转移载体构建、细菌内转座和昆虫细胞转染,以杆状病毒-昆虫细胞表达系统成功地表达了森林脑炎病毒MDJ01株prM-E蛋白.结果从感染细胞上清中电镜观察到重组蛋白形成的球型颗粒,说明重组病毒感染细胞后产生病毒样表达颗粒(virus like particlesVLPs),并且分泌至细胞外.免疫印迹试验和间接免疫荧光试验表明,表达的重组蛋白能够与抗森林脑炎病毒抗体特异结合,具有良好的抗原性.ELISA和间接免疫荧光染色证实,重组prM-E蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体.结论在昆虫细胞中表达的prM-E具有良好的抗原性,本研究为森林脑炎快速特异诊断试剂研制奠定了基础.

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