简套式荧光RT—PCR检测患者血清样本中SARS冠状病毒

作者：李振勇; 邵大晓; 李智涛; 冯艳铭; 景建洲...sars冠状病毒血清样本pcr检测套式患者核酸检测法检测方法基因序列设计引物荧光探针工作参数检测结果早期诊断检出率扩增仪试剂盒漱口液正常人一步法特异

摘要：目的建立一种快速、特异、灵敏的SARS冠状病毒(SARS-CoV)核酸检测方法.方法根据GenBank中SARS-CoV基因序列,自行设计引物、荧光探针,在PE 7700扩增仪上探讨工作参数,形成试剂盒,并用研制的试剂检测76份临床SARS样本.结果简套式荧光RT-RCR方法对血清样本、漱口液样本、正常人样本检出率分别为33.3%(12/36)、67.5%(27/40)、0(0/160),与经典套式检测结果一致.而传统一步法荧光RT-PCR对样本的检出率分别为13.9%(5/36)、52.5%(21/40)、0(0/80).结论简套式荧光RT-PCR核酸检测法是SARS临床早期诊断快速、特异、灵敏的方法.

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