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巴曲酶对下肢深静脉血栓患者内皮祖细胞的影响

作者:胡何节; 卞剑; 邓福生; 王晓天巴曲酶静脉血栓形成下肢内皮祖细胞新生血管化病理性

摘要:目的 探讨巴曲酶(DF-521)对下肢深静脉血栓(LEDVT)患者外周血内皮祖细胞(EPC)数量及其体外功能的影响.方法 将LEDVT患者随机分为对照组和治疗组,每组各18例.对照组仅给予低分子肝素(4000 U/12 h)和尿激酶(300 000 U/d)治疗,而治疗组给予相同剂量的尿激酶、低分子肝素和DF-521(5 U/2 d),分别于治疗7 d和3个月后评定各组疗效.于治疗前和治疗7 d后取患者外周血,通过荧光激活细胞分选检测外周血中EPC(CD34+VEGFR2+)的比例.应用密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞,将其诱导培养成内皮祖细胞(EPC).将EPC分为实验组(4组,1×10-2、2×10-2、4×10-2、8×10-2U/ml DF-521)和对照组(培养基).采用MTT比色法、一氧化氮(NO)试剂盒、体外血管形成试剂盒以及流式细胞仪检测细胞表型,透射电镜观察细胞超微结构.分析不同浓度DF-521对EPC增殖、NO分泌、血管形成以及向内皮细胞分化能力的影响.结果 治疗7 d后,治疗组和对照组的疗效差异无统计学意义(66.7%比66.7%,P〉0.05),而3个月后治疗组则优于对照组(94.4%比66.7%,P〈0.05).治疗7d后,治疗组患者外周血EPC含量显著高于治疗前(0.64±0.05比0.42±0.02,P〈0.05),并且显著高于治疗后对照组的含量(0.64±0.05比0.42±0.03,P〈0.05).对照组治疗前后无明显差异(0.41±0.03比0.42±0.03,P〉0.05).DF-521各实验组EPC吸光度A值、NO浓度、血管管腔样结构数均高于对照组(P〈0.05),而且各实验组的吸光度A值和NO浓度随着DF-521浓度的增加而升高(r=0.978、0.981,均P〈0.05),4×10-2 U/ml DF-521组血管管腔样结构数量最多.各实验组CD31和vWF的表达均高于对照组(P〈0.05),但各实验组之间差异无统计学意义(P〉0.05).透视电镜结果显示,8×10-2 U/mlDF-521组有内皮细胞的特有结构帕怀特小体.结论 DF-521可以改善LEDVT患者的预后,增加患者外周血EPC的数�

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