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烫伤大鼠结肠动力基本功能单位细胞损害和内质网应激研究

作者:李颖; 郭力烧伤结肠细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12葡萄糖调节蛋白78

摘要:目的了解严重烫伤大鼠结肠壁内神经运动末梢-肌间丛cajal间质细胞(ICC)-平滑肌细胞超微结构改变以及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)表达情况,探讨其在烫伤大鼠结肠动力损伤中的可能机制。方法采用简单随机法将50只SD大鼠分为烫伤组(40只):大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤,伤后腹腔注射乳酸林格液(50mg/kg)复苏。于伤后3、6、12、24h处死大鼠,在距盲肠约5cm处剪取近端结肠4cm肠管,取中间各1cm分别用体积分数3%戊二醛及体积分数10%甲醛固定。对照组(10只)除不烫伤外,其余处理同烫伤组。取戊二醛固定的标本,透射电镜下观察大鼠肠道细胞变化情况。取甲醛固定的标本,采用免疫组织化学法检测结肠壁中GRP78和caspase-12的表达。结果透射电镜下,对照组大鼠结肠平滑肌细胞排列整齐,肌细胞内细胞器丰富,核居中,常染色质均匀,线粒体嵴较多、滑面内质网较少,肌间丛神经元细胞器丰富,紧邻肌间丛神经元可见ICC;烫伤组肠道平滑肌细胞形状不规则,排列紊乱,核周隙增宽,细胞内有溶解性大空泡,线粒体空泡样变,嵴溶解、固缩,粗面内质网扩张并部分溶解,ICC核周细胞质明显减少。烫伤组伤后3、6、12h GRP78评分分别为(4.3±0.9)、(6.0±0.7)、(4.8±1.1)分,均高于对照组[(2.4±0.7)分,P〈0.05];烫伤组伤后6~24h caspase-12评分均高于对照组(P〈0.05)。对照组细胞均有GRP78表达,烫伤组强度染色主要出现在黏膜和肌间神经丛、间质细胞,而平滑肌细胞多呈轻中度染色。烫伤后3、12hGRP78呈阳性表达,伤后6h呈强阳性。caspase-12在伤后3h阳性表达不明显,伤后6、24h表达呈弱阳性,伤后12h表达呈阳性;对照组未见caspase-12表达。结论严重烫伤后大鼠结肠壁内神经运动末梢-肌间�

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