作者：欧阳云淑; 贾赤宇; 戚可名; 付小兵间质干细胞细胞外信号调节map激酶类热休克汗腺细胞
摘要：目的 观察人骨髓间充质干细胞（MSC）与热休克的人汗腺细胞（SGC）间接共培养后，其表型转化情况及细胞外信号调节激酶（ERK）通路所起的作用。方法 体外分离和培养人MSC、SGC，采用二步免疫细胞化学法鉴定其均为纯化的SGC、MSC。将原代培养的SGC于47℃下行热休克处理后收集上清液。将第3代MSC作为实验对象并分组。对照组：行常规培养；SGC上清液组：采用含体积分数30％SGC上清液、体积分数1％胎牛血清、1×10^5U／L青霉素和0．1g／L硫酸链霉素的DMEM／F12培养基培养；SGC上清液＋表皮生长因子（EGF）组、SGC上清液＋PD98059组同SGC上清液组处理后，分别添加50μg／LEGF、10μmol／LPD98059继续培养。培养7d时用流式细胞术检测各组细胞中细胞角蛋白（CK）7、癌胚抗原（CEA）的阳性表达率，以蛋白质印迹法检测ERK和磷酸化ERK（pERK）的表达水平。结果 SGC上清液组CK7、CEA阳性表达率分别为（5．76±0．10）％、（2．01±0．09）％；SGC上清液＋EGF组分别为（7．31±0．21）％、（7．27±0．12）％；SGC上清液＋PD98059组分别为（1．63±0．11）％、（1．54±0．07）％。与对照组比较，前两组两项指标均明显升高（P〈0．01），后一组却与之相近。各组细胞均表达ERK；但pERK水平以SGC上清液＋EGF组最高，其次为SGC上清液组，SGC上清液＋PD98059组和对照组几乎无表达。结论 人MSC、SGC间接共培养可诱导MSC表型转化，ERK通路参与该过程并起着积极作用。
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