作者：赵瑞; 刘建民; 周晓平; 黎莉; 赵文元; 霍...大鼠海马癫痫模型神经细胞凋亡海马神经细胞tunel发作后酶切cdna文库酵母
摘要：目的对癫痫模型海马神经细胞凋亡中caspase-3的作用机制进行实验研究. 方法以TUNEL法检测KA致痫大鼠海马神经细胞凋亡情况,以Western blot法检测其中eIF2α的表达变化.取模型鼠海马组织构建cDNA文库,构建caspase-3的酵母三杂交诱饵载体,进行筛库实验. 结果在癫痫发作后12 h TUNEL阳性神经元增加,72 h达高峰;发作后24 h出现eIF2α被caspase-3酶切的片段,逐渐增加至72 h.制作成功cDNA文库,构建了caspase-3的酵母三杂交诱饵载体,筛库获得caspase-3的新底物Miz1.结论在癫痫大鼠海马神经细胞凋亡中eIF2α被caspase-3酶切.酵母三杂交寻找caspase-3下游底物有可行性,从癫痫大鼠海马中获得caspase-3的底物Miz1.
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