作者:沈剑虹; 罗其中; 包映晖; 江基尧; 童菊芳神经元rna干扰sirnangr神经细胞培养
摘要:目的筛选能有效抑制神经元NgR表达的siRNA序列。方法根据siRNA靶序列设计原则,设计并化学合成针对大鼠NgR基因编码区的siRNA三对,并以一对无关序列的寡核苷酸作为阴性对照。原代培养的大鼠皮层神经元分为5组:siRNA—1组、siRNA-2组、siRNA-3组、无关序列组、非转染组,用阳离子脂质体Trans Messenger Transfection Reagent转染。转染后48h行RT—PCR和免疫细胞化学检测NgR表达水平的变化。结果转染48h后,与序列2、3和无关序列转染以及未转染的细胞相比,序列1转染的神经元NgRmRNA水平明显下降,并且其NgR抗体免疫荧光染色的荧光强度也明显减弱。结论化学合成siRNA能有效地抑制原代皮层神经元NgR的表达。
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社