作者：康春生; 浦佩玉; 李捷; 王虎; 董伦; 王广...c6胶质瘤体内外dna治疗实验研究胶质瘤细胞系cdna生长抑制作用dna构建体细胞增殖能力mtt法检测tunel法立体定向技术pcna表达肿瘤细胞增殖凋亡指数c6细胞凋亡细胞脂质体包裹蛋白印迹原位杂交转染反义
摘要：目的研究反义AKT2(antisense AKT2,AS-AKT2)cDNA对鼠脑胶质瘤细胞系C6的生长抑制作用.方法将AS-AKT2 cDNA构建体转染鼠脑胶质瘤细胞系C6,原位杂交和蛋白印迹鉴定后,应用PCNA阳性率和MTT法检测细胞增殖能力,TUNEL法计算凋亡指数.应用立体定向技术将C6细胞和转染反义AKT2 cDNA的C6细胞种植到SD大鼠的右侧尾状核作为对照组和转染组;并对颅内已经形成C6胶质瘤的大鼠进行脂质体包裹的AS-AKT2 cDNA和空载体治疗;MRI动态监测大鼠颅内肿瘤生长情况,并检测标本AKT2和PCNA表达以及细胞的凋亡情况.结果转染AS-AKT2cDNA后C6细胞AKT2表达显著抑制,增殖减慢,凋亡指数增加.反义治疗组和转染组大鼠生存时间明显延长;转染组和治疗组肿瘤标本AKT2表达下降或消失,PCNA阳性率降低,可见大量凋亡细胞,而对照组和空载组标本几乎没有凋亡细胞.结论体内外实验证明AS-AKT2 cDNA可以抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡,AKT2可作为基因治疗胶质瘤的重要优选靶的.
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