移植人羊膜间充质干细胞促进脑出血大鼠神经功能恢复

作者：周洪龙; 张鸿日; 闫中杰; 徐如祥间充质干细胞羊膜脑出血移植神经功能恢复

摘要：目的研究移植人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）是否能促进脑出血大鼠神经功能恢复，探索其可能作用机制。方法138只雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为人皮肤成纤维细胞（Fibroblasts）治疗组（46只）、磷酸盐缓冲液（PBS）治疗组（46只）和hAMSCs治疗组（46只）。脑出血模型采用颅内注射Ⅶ型胶原酶制作，24h后颅内移植hAMSCs、Fibroblasts和PBS。应用流式细胞仪检测hAMSCs表面抗原。免疫荧光检测细胞分化、血管再生和神经再生。酶联免疫吸附剂测定试剂盒检测脑源性神经营养因子（BDNF）和血管内皮生长因子（VEGF），改良神经功能评分（mNSS）检测行为学。结果分离培养的hAMSCs呈现成纤维细胞样细胞形态。表达CD29、CD44、CD90、CD105和CD166，不表达CD19、CD34和CD45。mNSS评分显示，颅内出血（ICH）7d后．hAMSCs组评分明显高于Fibroblasts治疗组和PBS治疗组，差异具有统计学意义（P〈0．05）。ICH后14d，hAMSCs组BrdU^＋细胞数目（55．33±6．59）高于Fibroblasts组（26．66±3．58）和PBS组（25．50±2．90），差异具有统计学意义（P〈0.05）。hAMSCs组Brdu^＋／DCX^＋细胞数目（30．66±3．65）高于Fibroblasts组（11．83±2．70）和PBS组（10．00±2．54），差异具有统计学意义（P〈0．05）。hAMSCs组血管性血友病因子^＋血管数目[（67．50±6．76）／mm^2]高于Fibroblasts组[（31．66±6．33）／mm^2]和PBS组[（28．83±5．58）／mm^2]，差异具有统计学意义（P〈0.05）。ICH后7d和14d，hAMSCs组BDNF表达水平[（63．16±2．31）pg／mg，（38．57±3．69）pg／mg]高于Fibroblasts组[（46．18±2．45）pg／mg，（20．52±2．81）pg／mg]和PBS组[（43．18±2．30）pg／mg，（18．28±2．39）pg／mg]，差异具有统计学意义（P〈0.05）。ICH后7、14、21d，hAMSCs组VEGF表达水平[（43．32±3．65）pg／mg，（30．90±2．62）pgmg，（24．89±2．85）pg／mg]高于Fibrob

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