作者：郭明高; 杨甲梅; 单云峰; 张辉; 李根丛; ...前s2抗体人乙型肝炎乙型肝炎病毒再感染腺病毒携带移植肝大鼠基因转染乙型肝炎病毒表面抗原人原代肝细胞hbv感染前s2抗原293细胞腺病毒感染腺病毒载体人源化抗体基因预防质粒载体抗体基因
摘要：目的探讨腺病毒携带人乙型肝炎病毒表面前S2抗体基因预防乙型肝炎病毒(HBV)再感染移植肝的作用.方法将人乙型肝炎病毒表面前S2抗原人源化抗体基因(Ab-H-HBV-S2)克隆入5型腺病毒穿梭质粒载体,在293细胞中重组,产生重组型腺病毒.用重组腺病毒感染冷保存时的大鼠供肝,获得人乙型肝炎病毒表面前S2抗体(简称为:前S2抗体)的表达.观察前S2抗体在体外保护人原代肝细胞不受HBV感染的效果.结果用50%组织培养感染剂量法(TCID50)测定重组腺病毒滴度为5.1×1010 PFU/ml.受鼠肝移植后3d时,血清中前S2抗体的表达量为(16.7±10.5)mg/L,7 d时的表达量为(30.9±13.6)mg/L.当受鼠血清中前S2抗体浓度≥0.5 mg/L时,与HBV和人原代肝细胞共同培养后,检测上清液中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)为阴性.结论全长Ab-H-HBV-S2基因克隆入腺病毒载体,感染大鼠供肝,获得人源化抗体的表达;表达的前S2抗体能保护人原代肝细胞不受HBV感染.
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