作者:郭荣; 邹萍; 金中奎; 陆华中; 范华骅; 高...raji细胞表达锤头状核酶主要组织相容性复合物dqegfpt载体rna
摘要:目的探讨抗主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类分子转录激活因子的锤头状核酶对Raji细胞表面经典MHCⅡ类抗原表达的抑制作用.方法设计并克隆针对MHCⅡ类分子转录激活因子(CⅡTA)第134、218、464位点的3个核酶片段(Rz134、Rz218、Rz464)及其相应的CⅡTA靶基因,分别插入pGEM-T载体,进行细胞外切割活性筛选.将切割作用明显的Rz464亚克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP,成为pIRES2-EGFP-Rz464(pRz464),将pRz464稳定转染Raji细胞株,流式细胞术检测Raji细胞表面MHCⅡ类抗原(HLA-DR、DP、DQ)的表达,并用逆转录聚合酶链反应分析Raji细胞CⅡTA mRNA的表达.结果转染pRz464的Raji细胞表面HLA-DR、DP、DQ抗原表达抑制率分别为95.93%、94.14%及98.32%,同时其CⅡTA mRNA的表达显著下调(P<0.05).结论Rz464可抑制Raji细胞表面MHCⅡ类抗原的表达.
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