作者：刘程伟; 胡新华; 王石; 张雪松; 王树卿; ...静脉寡脱氧核糖核苷酸类反义早期生长反应基因1
摘要：目的研究反义寡脱氧核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides，ASODN）抑制早期生长反应基因1（early growth response gene-1，Egr-1）表达对移植静脉血管平滑肌细胞增殖和内膜增生的影响。方法构建Egr-1 ASODN，建立自体静脉移植模型，Egr-1 ASODN转染移植静脉，术后随机分为1、2、6、24h，3、7、14、28、42d组，以未应用Egr-1 ASODN的大鼠为对照组。荧光显微镜检测Egr-1 ASODN转染移植静脉情况；应用原位杂交和RT—PCR方法检测Egr-1 mRNA的表达；联合应用免疫组织化学方法和Western blot检测Egr-1蛋白表达情况。结果实验组移植1h，Egr-1 ASODN主要位于移植静脉的外膜、中膜和部分内皮细胞（荧光灰度值为67±11），移植2h至24h，Egr-1 ASODN则主要位于移植静脉的中膜，移植7d，Egr-1 ASODN主要位于移植静脉的内膜。移植后期未检测到Egr-1 ASODN的表达。Egr-1 mRNA的表达只呈现一个高峰（基因表达值1．8±0．5）。移植早期Egr-1蛋白表达主要位于中膜的VSMC、部分单核细胞和内皮细胞，而移植后期在中膜和新生内膜的VSMC都未检测到Egr-1蛋白的表达。与对照组相比VSMC的增殖程度和内膜厚度均明显减轻（P〈0．01）。结论Egr-1 ASODN可显著抑制移植静脉的内膜增生，其作用可能是通过抑制Egr-1基因及其蛋白产物表达，从而抑制VSMC增殖、促进其凋亡而实现的。
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