作者：陈翔; 颜克香; 谢红付; 李吉cd147sirna表达载体鉴定t4dna连接酶pcr扩增片段cdna序列寡核苷酸浸润和转移作用机制皮肤肿瘤重组质粒插入片段基因库酶切r质粒线性化合成测序
摘要：目的构建CD147 siRNA表达载体,分析CD147在皮肤肿瘤浸润和转移中的作用机制.方法根据基因库上的CD147 cDNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链.寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSUPER质粒中,并对重组质粒(命名为pSUPER/CD147 siRNA)进行酶切、PCR及测序鉴定.结果PCR扩增片段与预期结果相符,双酶切证实CD147siRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致.结论成功构建CD147siRNA表达载体,CD147可为治疗肿瘤开辟新途径.
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