作者:付萌; 李巍; 王刚; 张衍国; 李承新; 樊平...igm抗体制备抗角蛋白单克隆抗体天然抗角蛋白瘤细胞生长无特殊病原体免疫印迹技术杂交瘤细胞株免疫组化蛋白抗原elisab淋巴细胞细胞融合igm型自发分泌小鼠脾脏肌肉组织脾细胞上清液
摘要:目的制备天然属性的抗角蛋白单克隆IgM抗体.方法取饲养在无特殊病原体条件下BALB/c小鼠的脾细胞,直接与SP2/0细胞融合.以提取的角蛋白抗原对阳性杂交瘤细胞生长孔进行ELISA筛选.采用免疫组化、免疫印迹技术对获得的抗体进行鉴定.结果不经任何免疫,细胞融合率为60%;14%的杂交瘤细胞生长孔上清液与角蛋白抗原结合;获得3株稳定分泌IgM型天然抗角蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株.免疫组化结果初步显示天然抗角蛋白IgM可以和表皮、皮脂腺、毛囊、肌肉组织结合.结论正常小鼠脾脏内存在自发分泌天然抗角蛋白IgM的B淋巴细胞.
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