作者:张鹏; 刘懿; 吴志浩; 陈军; 陈钢; 周清华肺肿瘤hmgb1蛋白细胞增殖肿瘤侵润rna小分子干扰
摘要:目的研究小干扰RNA(siRNA)抑制高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因表达对肺癌细胞L9981增殖和侵袭能力的影响。方法L9981细胞分3组,其中2组分别转染靶向HMGB1基因的siRNA(HMGB1-siRNA组)和无关序列siRNA(无关siRNA组),1组为空白对照组。转染后72h,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞HMGB1mRNA和蛋白表达水平;细胞活力计数仪测定各组细胞活力。分别在转染后24、48、72和96h应用噻唑蓝(MTY)法检测各组细胞生存状态。应用Boyden小室实验检测转染后72h各组细胞的体外侵袭力。结果HMGB1-siRNA组HMGB1mRNA相对表达量(1.0±O.0)明显低于无关siRNA组(12.8±1.3,P〈0.05)和空白对照组(12.1±1.0,P〈0.05),HMGB1蛋白表达水平也明显受到抑制;细胞活力(44.7%±1.7%)明显低于无关siRNA组(73.7%±2.1%,P〈0.01)和空白对照组(77.3%±1.9%,P〈0.01)。MTT测定显示转染后不同时间HMGB1-siRNA组L9981细胞生长均受到明显抑制。Boyden小室实验显示HMGB1-siRNA组穿膜细胞数(个/高倍视野,18.3±2.2)明显少于无关siRNA组(127.7±9.3,P〈0.01)和空白对照组(132.3±10.7,P〈0.01)。结论利用siRNA技术抑制HMGB1基因表达可有效抑制肺癌细胞的体外增殖和侵袭。
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