作者:纪文娟; 曲强; 金晔; 赵磊; 何小东肝细胞熊去氧胆酸凋亡半胱氨酸内肽酶类
摘要:目的应用骨髓间充质干细胞诱导来源肝细胞研究熊去氧胆酸(UDCA)在肝细胞凋亡过程中的作用机制。方法体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为成熟肝细胞,应用去氧胆酸(DCA)诱导细胞凋亡(DCA组),UDCA干预(D+U组),并设置非凋亡组(Cont组)和UDCA单独作用组(UDCA组)。凋亡细胞采用Hoechst染色和半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)活性检测,半定量RT.PCR及Realtime RT—PCR检测p53及BaxmRNA表达,免疫组化方法检测Bax蛋白表达。结果与Cont组比较,DCA组肝细胞凋亡的数量及半胱氨酸蛋白酶3活性都明显增加(P〈0.05),而在D+U组则被抑制(P〈0.05)。半定量RT—PCR及Realtime RT—PCR结果发现,p53及BaxmRNA的表达在DCA组中明显上调(P〈0.05),此上调可被UDCA抑制(P〈0.05)。DCA诱导的Bax(阳性细胞数量增加亦可被UDCA抑制。结论UDCA通过下调p53/Bax信号分子表达而抑制DCA诱导的肝细胞凋亡。
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