作者:李凯; 李明杰; 何涛; 郑直; 郑小林; 屈碧...胰腺肿瘤血管内皮生长因子c淋巴转移细胞凋亡原位种植
摘要:目的观察血管内皮生长因子C(VEGF-C)在人胰腺癌组织及胰腺癌裸鼠原位种植瘤模型中的表达特点,及其表达抑制后对胰腺癌细胞淋巴结转移的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测15例人胰腺癌原发灶和转移淋巴结组织中VEGF—C的表达差异。建立人胰腺癌细胞株PANC-1裸鼠原位种植瘤模型,原代培养原发和淋巴结转移灶中胰腺癌细胞,应用逆转录聚合酶链反应(RT.PCR)、酶联免疫吸附实验(ELISA)、流式细胞术、原位末端标记法(TUNEL)进一步检测VEGF—C的表达差异,并通过VEGF—C反义寡核苷酸(ASODN)体内外转染抑制其表达,研究对淋巴结转移胰腺癌细胞凋亡的影响。结果人胰腺癌淋巴结转移组织中VEGF—C的表达水平明显高于原发组织(8.6±3.4比4.6±2.8,P〈0.05);而种植瘤模型中淋巴结转移胰腺癌细胞VEGF-C的表达水平也显著高于原发灶细胞[mRNA:0.87±0.11比0.61±0.15,蛋白:(1682±157)pg/ml比(1404±128)pg/ml,均P〈0.05]。体内外转染VEGF—CASODN抑制其表达后,空白对照组、错义核苷酸组、ASODN组淋巴结转移胰腺癌细胞的凋亡率均显著提高[(2.8±1.0)%,(5.0±2.1)%,(13.2±2.2)%,均P〈0.01],而原发灶胰腺癌细胞无明显影响[(1.8±0.5)%,(2.0±0.7)%,(4.4±1.0)%,均P〉0.05]。结论在人胰腺癌组织及动物模型中,淋巴结转移灶胰腺癌细胞VEGF—C的表达均明显高于原发灶,并且其表达下凋能特异性促进淋巴结转移胰腺癌细胞的凋亡。
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