作者:徐文贵; 杨昆; 房娜; 戴东; 于津浦; 魏枫...乳腺肿瘤肿瘤移植自杀基因
摘要:目的进一步对已经获得的稳定表达自杀基因HSV1-tk的乳腺癌细胞株T47D—tk进行鉴定,观察其生长特性,建立移植瘤动物模型。方法提取细胞基因组、以HSV1-tk P1和HSV1-tkP2为引物,进行PCR反应,琼脂糖凝胶电泳基因鉴定。描绘生长曲线、镜下观察细胞形态。BALB/c nu/nu裸鼠前肢皮下接种T47D和T47D—tk细胞,并观察二者的成瘤特性。结果T47D-tk细胞基因组DNA进行PCR检测可见到大小约1131bp的片段,而正常的T47D细胞基因组则无此阳性条带出现。两组平均生长细胞数,第1天T47D:(5.58±1.04)×10^3,T47D-tk:(6.08±1.61)×10^3;第3天T47D:(10.00±1.30)×10^3;T47D—tk:(10.25±0.90)×10^3;第7天T47D:(19.25±0.66)×10^3,T47D—tk:(19.00±1.80)×10^3,两组间差异均无统计学意义(均P〉0.05),形态观察亦未见明显差别。接种后两组成瘤时间[T47D:(9.67±0.33)d;T47D—tk:(9.83±0.48)d]和肿瘤大小差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论T47D—tk细胞基因组中已整合人HSV1-tk基因,与T47D细胞相比生长特性无变化,成功建立了T47D和T47D—tk移植瘤动物模型,为进一步基因显像与基因治疗奠定了基础。
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