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受体相互作用蛋白140敲低对小鼠小胶质瘤细胞增殖的影响

作者:晁爽; 郁卫东; 杜军保; 曾超美; 梁蓉; 杨...神经胶质瘤细胞增殖受体相互作用蛋白140

摘要:目的探讨受体相互作用蛋白(RIP)140基因敲低对小鼠小胶质瘤细胞(BV-2)增殖的影响。方法用脂质体转染方法将RIP140-短发夹RNA(shRNA)质粒导入BV-2细胞,用嘌呤霉素筛选稳定表达RIP140-shRNA的细胞系,用实时定量PCR和Western印迹法检测RIP140敲低的效果,用四甲基偶氮唑蓝(MTY)法检测RIP140敲低对细胞增殖的影响。结果成功构建稳定表达RIP140-shRNA的BV-2-71674和BV-2-71080;与BV-2细胞相比,BV-2-71674和BV-2-71080细胞中RIP140的表达无论mRNA水平还是蛋白质水平均明显低,下调率(mRNA)分别为73%和75%(均P〈0.01);MTT法检测显示,BV-2细胞在24、48、72、96h 4个时间点增殖率分别为3.03±0.01、7.36±0.08、14.15±0.25、23.35±0.09,BV-2-71674细胞则分别为2.15±0.03、6.43±0.08、11.77±0.31、18.47±0.04,BV-2-71080细胞分别为1.77±0.03、4.74±0.25、10.03±0.02、17.66±0.21;BV-2-71674和BV-2-71080细胞增殖率均明显低于BV-2细胞,差异均有统计学意义(均P〈0.01)。结论RIP140敲低可以抑制BV-2细胞的增殖。

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