作者:沈文静; 戴冬秋; 滕玥; 刘洁胃肿瘤甲基化p16基因组蛋白脱乙酰化丁酸钠
摘要:目的探讨组蛋白脱乙酰基酶抑制剂丁酸钠(NaB)对体外培养的胃癌细胞系SGC7901和BGC823生长及p16基因表达的影响。方法应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素染色法检测细胞凋亡率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质印迹法检测p16基因mRNA及蛋白质表达,甲基化特异性PCR法(MSP)检测p16基因的甲基化状态。结果NaB处理后SGC7901和BGC823细胞生长受到抑制,1×10^-3,3×10^-3,5×10^-3mol/LNaB处理72h后两株细胞G0/G1期细胞数量显著增加,S期细胞数显著降低(P〈0.01),呈现G1阻滞,各浓度组细胞凋亡率均显著增加(P〈0.01)。p16基因在SGC7901及BGC823细胞中低表达,启动子区呈异常甲基化状态,NaB处理后在两株细胞中表达均增强。结论NaB对胃癌细胞具有生长抑制作用,其机制可能与阻滞细胞周期、诱导凋亡及上调p16基因表达有关,NaB可能通过增加组蛋白乙酰化水平及甲基化下调增加胃癌细胞中p16基因的表达。
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