作者:王春亭; 孟玫乙酰化作用基因表达组蛋白类细胞周期
摘要:目的通过应用组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(TSA)调节人肺腺癌细胞A549中组蛋白去乙酰化酶3的表达,观察肺腺癌细胞A549生长抑制、细胞周期阻滞以及对抑癌基因表达的变化。方法培养人肺腺癌细胞A549,应用MTT比色法观察TSA对A549细胞的生长抑制作用,流式细胞术分析细胞周期,以RT—PCR、Western印迹分别检测A549细胞中组蛋白去乙酰化酶3、P^21WAFL/CIPt和蛋白的表达水平。结果TSA处理后A549细胞的生长受到抑制(24h时对照组和各处理组细胞抑制率分别为6.2%±1.1%、18.5%±2.3%、28.9%±3.6%、39.4%±3.7%、45.6%±2.7%,P〈0.05;48h时分别为8.1%±2.3%、26.9%±4.2%、35.6%±3.8%、56.5%±6.1%、69.8%±5.3%,P〈0.05;72h时分别为10.5%±1.3%、28.4%±3.2%、50.5%±5.8%、70.5%±6.9%、78.6%±4.5%,P〈o.05),细胞阻滞于G1期(对照组和各处理组细胞G1期分布:56.5%±8.1%、70.5%±6.7%、78,6%±4.6%、82.4%±3.7%、85.6%±7.5%,P〈0.05),P^21WAFL/CIPt基因表达水平增强(对照组和各处理组RT—PCR吸光度分别为o.09、0.17、0.20、0.27、0.35,P〈0.05)。同时TSA处理A549细胞中组蛋白去乙酰化酶3的基因表达水平明显降低。结论TSA可能通过抑制组蛋白去乙酰化酶3,提高组蛋白的乙酰化水平诱导P^21WAFL/CIPt基因表达。
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