作者：张明生; 周云峰; 谢丛华; 张文杰; 周福祥...信号传递结肠肿瘤shrna脱噬作用
摘要：目的 探讨细胞信号传导子和转录激活子6（STAT）信号传导通路与结肠癌细胞凋亡的关系。方法构建4个STAT6特异的shRNA质粒载体，应用阳离子脂质体瞬时转染人结肠癌细胞HT-29，以阻断Stat6信号通路；分别用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测STAT6 mRNA表达和运用流式细胞术检测磷酸化STAT6蛋白（pSTAT6）表达来筛选有效的小发夹RNA（shRNA）；运用流式细胞术分析细胞凋亡变化；RT-PCR和Western印迹观察Bcl-2和Bax基因表达。结果成功构建并筛选出两个STAT6特异的shRNA质粒载体；STAT6基因沉默的结肠癌细胞中凋亡细胞明显增加，空白对照组细胞早期凋亡率为0．4％，pshRNA-STAT6-1组和pshRNA-STAT6-4组分别为13．0％和8．8％（P〈0．05）；Stat6信号通路被阻断的结肠癌细胞中Bcl-2基因表达明显减少，而Bax蛋白基因表达明显增多（P〈0．01）。结论Stat6信号传导通路能抑制结肠癌细胞凋亡，可能是通过调节Bcl-2和Bax基因的表达发挥作用。
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