作者：陈菊祥; 卢亦成; 胡国汉; 孙克华; 骆纯; ...脑肿瘤lnx基因酵母双杂交免疫沉淀人脑胶质瘤组织分布基因克隆notch信号途径northern杂交蛋白相互作用
摘要：目的探讨人脑胶质瘤相关LNX新基因克隆、组织分布和在不同级别星形细胞瘤中的表达以及其参与胶质瘤信号途径的分子机制.方法构建胎脑cDNA文库并测序获得全长LNX新基因;人多组织文库(MTC)为模板研究LNX的正常人体组织分布;含13 939种人类基因表达谱芯片检测LNX在脑星形细胞瘤中的表达;Northern杂交验证LNX在不同级别胶质瘤中的表达;酵母双杂交研究与LNX相互作用的蛋白,免疫共沉淀验证LNX与Numb蛋白和SKIP蛋白的相互作用.结果人胎脑文库中克隆的LNX新基因长约3.7kb,含1 899bp开放阅读框,编码632氨基酸蛋白,分子量约70kDa,登录号AF237782;LNX在脑、肾和胰腺中表达较高,在心、胎盘、肺、肝、脾、胸腺和前列腺中也有表达;但LNX在胶质瘤组织中表达均降低,与肿瘤发生密切相关;酵母双杂交筛选到LNX与肿瘤Notch信号途径中的Numb和SKIP蛋白有相互作用,免疫共沉淀发现LNX与SKIP蛋白相互作用,可影响Numb的亚细胞定位,从而影响Notch信号途径Numb结合位点.结论表达谱芯片可快速高效锁定与胶质瘤密切相关的基因和寻找肿瘤标志物,LNX与胶质瘤密切相关,通过Notch信号传导途径参与脑胶质瘤发生发展,可成为胶质瘤潜在的治疗靶标.
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