作者：石长清; 李正东; 张群华; 倪泉兴; 金忱; ...pc3细胞胰腺癌人血纤溶酶原脂质体转染法基因血管内皮细胞阳性克隆稳定表达蛋白
摘要：目的将人血纤溶酶原Kringle 5基因导入人胰腺癌PC3细胞,观察其对人胰腺癌PC3细胞系的基因治疗作用.方法将外源性Kringle 5通过脂质体转染法导入人胰腺癌PC3细胞,筛选阳性克隆,同时设空质粒组及PC3细胞为对照.采用RT-PCR、免疫组织化学、MTT、电镜、流式细胞术等方法,鉴定及检测转染前后细胞超微结构、细胞周期及Kringle 5蛋白表达情况,并用血管内皮细胞增殖实验及裸鼠接种检测目的胰腺癌细胞株表达的Kringle 5蛋白抑制血管内皮细胞生长的活性及裸鼠移植瘤生长情况.结果人血纤溶酶原Kringle 5基因及蛋白水平在胰腺癌PC3细胞系均可以稳定表达,能抑制ECV304血管内皮细胞生长及具有抑制裸鼠移植瘤生长的作用.结论成功转染人Kringle 5基因的人胰腺癌PC3细胞可稳定表达Kringle 5蛋白,且具有抗血管内皮细胞增殖活性的良好作用,为进一步进行体内抗血管生成基因治疗奠定了基础.
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