作者：马彩玲; 李轶杰; 张富春; 王国荃; 郑玉建...荧光定量聚合酶链法宫颈肿瘤人乳头瘤病毒16e6基因脱落细胞学检查
摘要：目的建立荧光定量聚合酶链(FQ-PCR)方法检测宫颈细胞中人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6基因的方法.方法以220例新疆妇女宫颈不同病变组织DNA作为样本,人乳头瘤病毒16型(新疆株)E6基因(HPV16E6,AF327851)作为扩增的靶基因,同时以人β-肌动蛋白基因片段作为内参照,借助于设计的目的基因引物,两个特异的荧光探针,在筛选的FQ-PCR优化反应体系中,同时对两个基因片段进行扩增,得到HPV16E6的相对含量.结果对β-肌动蛋白阳性的宫颈不同病变组织中HPV16E6阳性率及其相对含量进行统计分析,新疆妇女宫颈脱落细胞标本96例中,HPV16E6阳性3例(3.3%);宫颈癌蜡块组织59例中HPV16E6阳性49例(83.0%);宫颈上皮内瘤变(CIN)蜡块组织65例中,HPV16E6阳性28例(75.7%);宫颈炎蜡块组织33例,HPV16E6阳性28例(93.3%).HPV16E6的相对含量随病情加重呈上升趋势,二者呈显著正相关,相关系数为O.83.结论建立的FQ-PCR检测宫颈不同病变组织内HPV16E6基因的方法,能反映单位细胞人乳头瘤病毒的复制情况,筛查宫颈癌患者,并可能应用于宫颈癌的风险评估和疗效观察.
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