作者：马瑞; 吴赛珠; 林其谁睾酮血管平滑肌细胞雄激素受体蛋白表达western印迹法冠心病动脉粥样硬化
摘要：目的观察睾酮对雄性大鼠血管平滑肌细胞中雄激素受体(AR)蛋白表达的调控作用,并对其调控水平作初步探讨.方法贴块法培养雄性SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,分别用细胞裂解和高盐提取法制备细胞质和细胞核抽提物,Western印迹法检测提取物中AR水平.结果不同浓度(0～4 μmol/L)睾酮与静止的血管平滑肌细胞作用24 h呈剂量依赖性地增加胞质和胞核内AR蛋白含量,生理水平(40 nmol/L)睾酮与细胞作用10 min引起胞质内AR蛋白水平的快速下调,继而呈时间依赖性(1～48 h)地增加胞质和胞核内AR蛋白表达;预先给以转录抑制剂更生霉素和翻译抑制剂cycloheximide则能使上调的胞质内AR蛋白分别降至单纯睾酮刺激组水平的46%和12%;雄激素拮抗剂氟他胺也能够部分抑制(50%)睾酮对细胞内AR蛋白水平的上调作用.结论血管平滑肌细胞中存在睾酮对AR蛋白表达的自身上调作用,其中伴随着受体的核转位;调控过程既有转录机制、也有转录后机制的参与,并且需要功能性AR的介导.
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