作者:裴斐; 赵明辉; 汪莺昱; 张颖; 王海燕狼疮肾炎抗肾小球系膜细胞抗体靶抗原鉴定western印迹法自身免疫性疾病
摘要:目的研究狼疮肾炎血清中新发现的抗肾小球系膜细胞抗体与抗DNA抗体的关系,及其靶抗原是否存在于细胞膜上.方法 DNA纤维素柱亲和层析分离狼疮肾炎患者血清中的抗DNA抗体,Western印迹法检测祛除抗DNA抗体的血清和亲和层析纯化的抗DNA抗体与系膜细胞靶抗原的结合.从体外培养的人系膜细胞系分离细胞膜并提取膜蛋白,以已知抗肾小球系膜细胞抗体阳性血清为探针应用Western印迹法鉴定膜蛋白中的靶抗原.结果系膜细胞中相对分子质量为74 000、36 000的蛋白可以被祛除抗DNA抗体的血清识别.而相对分子质量为63 000、91 000、125 000的蛋白被亲和层析的抗DNA抗体识别.系膜细胞膜上至少相对分子质量为101 000、91 000、74 000和31 000的蛋白可以被狼疮肾炎患者的血清识别.结论部分抗肾小球系膜细胞抗体与抗DNA抗体无关.人系膜细胞系的膜蛋白中存在狼疮肾炎血清可识别的抗原物质,提示抗DNA抗体以外的直接针对肾小球系膜细胞的自身抗体在狼疮性肾炎的发病机制中可能起重要作用.
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