作者：张华; 郭澍; 佟爽; 陈义庆; 崔梦莹; 赵崇...脂肪干细胞外泌体提取鉴定成骨
摘要：目的通过改良后的ExoQuick试剂盒法、超速离心法、ExoQuick试剂盒法提取脂肪干细胞(ADSCs)来源外泌体,探讨提取的外泌体对ADSCs成骨分化诱导的影响,并且对3种提取方法进行比较。方法使用改良后的ExoQuick试剂盒法、超速离心法、ExoQuick试剂盒法提取外泌体,进行形态学观察及特异性表面标志物CD9、CD63蛋白鉴定;分别将3种方法提取的外泌体加入ADSCs成骨分化诱导过程中,通过对照实验检测形态学变化及Runx2、OCN蛋白表达。结果改良后的ExoQuick试剂盒法、ExoQuick试剂盒法提取的样本均能观察到圆形、类圆形膜性囊泡结构,特异性表面标志物CD9、CD63均可表达,且ExoQuick试剂盒改良法蛋白表达量最多。与未加外泌体的过程相比加入外泌体的ADSCs成骨诱导过程Runx2、OCN蛋白表达明显增多,且Exo-Quick试剂盒改良法蛋白表达量最多。结论ExoQuick试剂盒改良法提取ADSCs来源外泌体效率最高,提取的外泌体促进成骨效应最强。
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