作者：杨宏伟; 陈晓隆; 徐成海; 黄永刚真空实验研究酶组织细胞化学染色冷冻干燥保存法角膜内皮细胞活性atpase深低温冷冻保存酶组织化学染色三磷酸腺苷酶琥珀酸脱氢酶长期保存方法细胞酶活性化学方法冻干保存同时进行阳性反应光镜观察光密度值
摘要：目的通过光/电镜酶组织细胞化学方法测定兔角膜内皮细胞酶活性,探讨真空冷冻干燥保存法(冻干法)对于兔角膜内皮细胞活性的影响.方法按随机及配对原则将兔眼分为新鲜对照组、冷冻对照组、冻干实验组.对冷冻组进行角膜深低温冷冻保存.对冻干组进行真空冷冻干燥保存.将冷冻及冻干保存的兔角膜片分别复水及复温后,与新鲜的角膜片同时进行三磷酸腺苷酶(AT-Pase)、琥珀酸脱氢酶(SDH)的光镜及电镜酶组织细胞化学染色,观察三组酶的活性是否有差异.结果在新鲜组、冷冻组、冻干组中,ATPase及DSH的酶组织化学染色在光镜观察下均呈阳性反应.三组样本内皮细胞ATPase和SDH酶的平均积分光密度值(IOD)差异具有统计学意义(P＜0.01)冻干组活性较低.电镜酶组织细胞化学染色见三组样本角膜内皮细胞膜上均有电子致密颗粒沉着.结论真空冷冻干燥保存法可使离体角膜内皮细胞保持一定的活性.与新鲜及冷冻保存的兔角膜相比,活性较低.但可以推测冻干法有望成为一种新的角膜长期保存方法.
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