作者:冯俪; 聂思静; 黄艺华; 黄小丹; 蔡皓璠; ...堆型艾美耳球虫热休克蛋白90克隆表达核酸疫苗免疫保护
摘要:利用RT-PCR方法从鸡堆型艾美耳球虫(E.acervulina)子孢子中成功克隆热休克蛋白90(Hsp90)基因,并构建其原核和真核表达质粒pET30a-Hsp90和pVAX-Hsp90.重组表达的89 kD可溶蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,间接ELISA和Western-Blot表明,其反应性和特异性良好.真核表达质粒pVAX-Hsp90体外瞬时转染间接免疫荧光检测可见成功表达.雏鸡真核表达质粒免疫后进行攻虫保护试验,结果表明,pVAX-Hsp90组较空载体组及PBS组增重极明显(P<0.01),且肠道病变减轻,OPG减少,抗球虫指数为166.17.综上初步评价了Hsp90核酸疫苗的免疫保护作用,表明Hsp90是一种潜在的鸡球虫保护性抗原.
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