作者：陈延飞; 覃尧; 李夏莹; 王永强; 李晓齐; ...鸡传染性贫血病毒vp2蛋白原核表达单克隆抗体
摘要：为制备CIAV VP2单克隆抗体,将原核表达的His-VP2融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠.经4次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞（SP2/0）融合.将原核表达的GST-VP2融合蛋白作为包被抗原,利用间接ELISA筛选阳性克隆.阳性细胞株经3次亚克隆后,获得3株稳定分泌抗CIAV VP2蛋白的杂交瘤细胞克隆,分别命名为3D7、3B8、2D3.经间接ELISA测定,以上3株杂交瘤细胞腹水效价分别为1∶8.0x 105、1∶4.0x105,以及1∶6.4x106,亲和力解离常数分别为7.34x10-11、2.65x 10-11,以及2.98x10-11.IgG亚类分别为IgG1、IgG2b以及IgG2b.经Western Blot试验证明,3D7株单抗能特异地识别CIAV VP2蛋白,其识别的抗原表位区域为VP2 N-端的2040 aa.经IFA试验证明,3株单抗均能识别天然的CIAV VP2蛋白.此单抗为研究CIAV VP2的生物学功能和CIAV致病机理奠定基础.
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