作者：董浩; 马磊; 单晓枫; 胡桂学原位pcr鹅细小病毒霍尔多巴吉白鹅
摘要：通过建立能对石蜡切片中鹅细小病毒（GPV）核酸进行定位韵原位PCR方法，为GPV在鹅体内的定位、致病机理研究等提供有效的试验手段。根据GPV的VP3基因序列设计PCR引物和寡核苷酸探针，以GPV感染鹅肝脏和空肠组织石蜡标本制作切片，经蛋白酶K消化、原位PCR扩增和碱性磷酸酶标记的寡核苷酸探针原位杂交，建立了检测石蜡标本中GPV的间接原位PCR方法并应用于自然感染GPV高免血清紧急免疫后鹅肝脏和空肠组织临床病料检测。结果显示间接原位PCR对人工感染GPV死亡鹅肝脏和空肠的石蜡标本检测结果为阳性，而鹅病毒性肝炎、鹅多杀性巴氏杆菌病、鹅沙门菌病和鹅大肠杆菌病死亡鹅肝脏的石蜡标本检测结果为阴性；间接原位PCR对自然感染GPV高免血清紧急免疫后第6天的鹅肝脏和空肠组织检测20个样本中，空肠组织有8个呈阳性，肝脏组织有4个阳性结果均为阳性，阳性细胞有空肠上皮细胞、肝窦上皮细胞等。
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