作者:郭杨; 陈世界; 郭万柱高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒taqman荧光探针
摘要:根据GenBank登录的高致病性PRRSV Nsp2基因序列利用Primer Express3.0软件设计合成了引物和探针;对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。同时用建立的检测方法对以定量的10倍系列稀释质粒pMD-Nsp2为标准品进行了检测,并与常规RT-PCR做了对比。结果显示,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法灵敏度可达3.15拷贝,比常规RT-PCR灵敏度高100倍。用该方法对3份不同的标准品进行了重复检测,结果表明,该方法具有良好的重复性,可满足当前高致病性PRRSV的诊断需要。
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