作者：李楠; 虞平添; 焦兆群; 陈立群; 郑阳; 黄...龟甲鳖甲掺伪特异性扩增
摘要：目的 基于特异性扩增建立动物药龟甲与鳖甲的真伪鉴定技术。方法 根据龟甲与鳖甲及3种常见伪品的全基因组序列的差异设计了5对特异性引物（PCR、PTS、PMS、PPS、PAF）,采用SDS法、酚仿抽提法从龟甲与鳖甲中提取与纯化DNA,并通过聚合酶链式反应（PCR）对目标片段进行扩增,产物以琼脂糖凝胶电泳分析及凝胶成像系统检测,并根据电泳条带的有无及分子量大小以鉴定真伪。结果 龟甲与鳖甲及其常见伪品巴西龟、花龟、佛罗里达鳖的DNA经扩增后分别在120、120、81、105、114 bp处产生条带,且引物间无交叉反应,体现出很强的专属性,5个物种DNA的检出限为1 ng。自制药材、饮片、掺伪品均扩增出与目的片段相一致的条带。在市售样品中,18批龟甲和20批鳖甲经鉴定为正品,2批龟甲药材经鉴定为来源于巴西龟的伪品。结论 本文所建立的技术可准确、快速地鉴定龟甲与鳖甲的真伪,有助于监控其产品质量。
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