作者：路榕 郭萃 陶晓倩 柳海燕 时姗姗 林钗英 ...膜联蛋白5精子膜低渗肿胀试验吖啶橙荧光染色dna完整性
摘要：目的：研究膜联蛋白5（Annexin5）对人精子细胞膜及DNA完整性的影响。方法：①精子膜完整性测定：按精子浓度〉20×10^6/ml;活率〉60%选取标准收集精液标本53份,分为3组,实验组为47.5μl精液中加入2.5μl10^-6mol/L的Annexin5;阴性对照组为47.5μl精液标本中加入2.5μl1mol/L的Tris-HCl（pH8.0,25℃）;空白对照组为47.5μl精液标本中加入2.5μl0.01mol/L的PBS（pH7.4）,作用20min后,通过精子低渗肿胀试验（HOS）检测精子膜的完整性。②DNA完整性测定：同方法①,3组实验标本作用20min后,每份标本加入2.5μl0.02mol/L的H2O2,作用60min,通过吖啶橙（AO）荧光染色检测精子核DNA的完整性。结果：An-nexin5处理20min后低渗肿胀精子百分率与空白对照组及阴性对照组比较均具有极显著差异[（66.17±12.02）%vs（58.13±13.08）%,P〈0.01;（66.17±12.02）%vs（59.94±11.91）%,P〈0.01];空白对照组与阴性对照组比较无显著性差异。加入H2O2后,Annexin5组的DNA碎片指数与空白对照组及阴性对照组比较均具有极显著差异[（6.39±1.07）%vs（11.16±1.16）%,P〈0.01;（6.39±1.07）%vs（10.86±1.05）%,P〈0.01],空白对照组与阴性对照组比较无显著性差异。结论：Annexin5蛋白能在体外提高低渗肿胀精子百分率,对精子膜的完整性具有保护作用,同时对HO作用引起的精子核DNA破坏起保护作用。
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