作者:牟丹蕾; 白雪帆; 黄长形; 王英鹏; 潘蕾; ...共转染表达量汉滩病毒cho细胞蛋白高效表达细胞膜外源基因
摘要:目的探讨整合素β3表达与汉滩病毒(HTNV)感染的关系.方法将人整合素β3、αv及αⅡb真核表达载体分别及共转染至CHO细胞,采用间接免疫荧光测定(IFA)、流式细胞计数(FCM)检测外源基因的表达;然后用HTNV A9株感染稳定转染的CHO细胞,应用IFA和FCM检测病毒抗原. 结果整合素β3在共转染组细胞中高效表达,且目的蛋白主要定位于细胞膜上;β3单转染组目的蛋白虽有一定量的细胞膜表达,但表达量低于共转染组(P<0.05);αv和αⅡb单转染组目的蛋白的表达量明显低于共转染组(P<0.01),且定位发生变化.病毒感染率共转染细胞较高,CHO/αvβ3和CHO/αⅡbβ3细胞分别为60.1%和55. 9%;未转染β3的细胞感染率较低,CHO细胞仅为1%;而单转染β3细胞介于两者之间(38.7%).结论汉滩病毒感染率与整合素β3表达水平密切相关,整合素β3可以促进HTNV的入胞作用.
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