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SP600125对周期牵张致A549细胞上调白细胞介素-8表达的影响

作者:王月兰; 刘玉华; 姚尚龙细胞系肿瘤白细胞介素8丝裂原激活蛋白激酶类周期牵张

摘要:目的探讨SP600125对周期牵张致A549细胞上调白细胞介素-8(1L-8)表达的影响。方法将A549细胞以密度为5×10^5种植于特制的硅胶树脂膜上,DMEM培养基培养48h后,置于细胞牵张仪行周期性牵张。牵张组:牵张强度为细胞体积扩大15%,牵张周期:30个周期/min,牵张时间分别为0(未进行牵张)、15、30、60、120min。预防处理组:将JNK抑制剂SP600125加入培养基,终浓度为50μmmol/L孵育30min后再行上述处理,收集细胞和培养液,提取细胞中的总蛋白和RNA,用RT—PCR方法测定细胞IL-8 mRNA表达,用Western blot测定细胞JNK和磷酸化JNK(p-JNK)的水平,采用ELISA法测定细胞培养液中IL-8浓度。结果周期牵张30—120min可导致牵张组A549细胞IL-8 mRNA、IL-8浓度增加,且呈时间依赖性,周期牵张120min时达高峰,p-JNK水平升高;SP600125可减弱周期牵张导致的上述改变(P〈0.05)。结论周期牵张致A549细胞IL-8的上调与JNK的激活有关。

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