作者：宋雪松; 杨桐伟; 杜波; 佟丹梅; 杜宝东; ...鞘内注射脊髓背角神经痛磷酸化camp反应元件结合蛋白蛋白表达有丝分裂素激活蛋白激酶细胞外信号调节激酶免疫组织化学方法pcreb神经病理性疼痛机械性刺激信号传递通路模型大鼠正常大鼠二甲基亚矾对照组
摘要：目的观察鞘内单次注射U0126(有丝分裂素激活蛋白激酶激酶的阻滞剂)对大鼠脊髓背角磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)表达的影响,探讨细胞外信号调节激酶(ERK)-CREB信号传递通路在神经痛中的作用.方法第一部分 40只坐骨神经慢性损伤(CCI)模型大鼠随机分为5组(n=8):U1组、U2组、U3组和U4组分别鞘内注射0.2、0.5、1、和5μgU0126,C组(模型对照组)单次鞘内注射5%二甲基亚矾10μl,另取8只正常大鼠鞘内注射5.0μgU0126作空白对照组.采用vonFrey纤维丝及热痛刺激仪测定大鼠术侧后肢的机械性缩爪阈值和热刺激缩爪阈值.第二部分50只CCI模型大鼠随机分为5组(n=10):T1、T2、T3、T4组分别在鞘内注射5.0μgU0126后0.5、2、6、12 h处死,CCI组为模型对照组,另取10只正常大鼠作对照组.采用免疫组织化学方法测定术侧脊髓背角pCREB免疫反应阳性神经元数量,采用免疫印记法测定脊髓背角pCREB表达.结果第一部分空白对照组注射U0126 5.0μg对机械性缩爪阈值和热刺激缩爪阈值没有影响.与C组比较,U1组注药后各时点及U2组注药后2、6、12、24 h时大鼠术侧机械性刺激缩爪阈值及热刺激缩爪阈值差异无统计学意义(P＞0.05),U2组注药后0.5 h及U3组、U4组注药后0.5、2、6、12 h时大鼠术侧机械性刺激缩爪阈值和热刺激缩爪阈值延长或增加(P＜0.05).第二部分鞘内注射5.0μgU0126可以减少脊髓背角pCREB表达,并且可以持续至少6 h.结论 ERK-CREB通路参与神经病理性疼痛的形成与维持.
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