作者：胡东亮 欧阳金芝 马鑫 李宏召 王保军 史...h295r细胞肾上腺肿瘤增殖
摘要：目的研究类固醇生成因子-1（SF-1）基因下调对人肾上腺皮质腺癌H295R细胞的影响，并探讨SF-1在肾上腺肿瘤发病中的作用。方法用含SF-1特异性短发夹（shRNA）序列的质粒载体pGenesill—SF1shRNA及含非特异性序列的阴性对照质粒pGenesill—negative-shRNA分别转染H295R细胞。48h后用蛋白质印迹法和荧光定量PCR检测SF-1表达水平。WST-1法及细胞计数法检测转染后细胞增殖情况，免疫组化SABC法检测转染后各细胞组中Ki67表达，TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果SF-1-shRNA有效地抑制了SF—1的表达，在蛋白水平和mRNA水平的抑制率分别为69．07％和71．02％（P〈0．01）。WST-1及细胞计数法均显示SF-1基因沉默组细胞增殖缓慢，增殖明显受到抑制（P〈0．01）；而TUNEL结果恰好相反，荧光镜下SF-1基因沉默组凋亡细胞的数目及形态均比较明显，凋亡细胞数约为阴性对照组的3．7倍（P〈0．01）；SF-1基因干扰后，其Ki-67阳性细胞率要低于阴性对照组细胞，分别为（16．90±2．17）％和（33．48±3．16）％（P〈0．01）。结论SF-1基因沉默可抑制肾上腺皮质腺癌细胞增殖，有望成为研究肾上腺肿瘤发病机制及其治疗的重要分子。
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