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载脂蛋白A1对胆固醇逆转运及三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的影响

作者:陈晓春; 赵美丽; 邹云增; 葛均波泡沫细胞atp结合匣式运转子动脉粥样硬化

摘要:目的观察载脂蛋白A1(apoA1)对人急性单核细胞白血病细胞株(THP-1)源性泡沫细胞内胆固醇、胆固醇酯含量和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ABcA1)表达的影响和机制。方法以50ng/ml的佛波酯诱导人THP-1,使其分化为巨噬细胞,再经50μg/ml氧化型低密度脂蛋白充分诱导使其转变为负脂的泡沫细胞;然后用不同浓度apoA1(5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20ug/ml)孵育泡沫细胞24h,以apoA1(10μg/ml)孵育泡沫细胞6h、12h、24h。采用油红0染色观察细胞内脂滴的变化,用氧化酶法检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量;用反转录聚合酶链反应检测不同浓度apoA1干预泡沫细胞后ABCA1mRNA的表达;用免疫荧光法检测经不同浓度和不同时间apoA1和ABCA1多克隆抗体干预泡沫细胞后ABCA1蛋白的表达。结果(1)THP~1经佛波酯(50ng/ml)和氧化型低密度脂蛋白(50μg/ml)分别干预48h后可成功诱导为富含脂质的泡沫细胞;(2)apoA1可促进THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇逆向转运,减少细胞内胆固醇含量,呈浓度依赖性和时间依赖性;(3)随着apoA1干预浓度增加,THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内ABCAlmRNA的表达变化不显著,但蛋白表达增加,0ug/ml与5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/mlapoA1干预浓度下油红0染色阳性细胞率分别为(55±4)%与(43μ9)%、(33μ4)%、(28μ1)%、(26±2)%,差异有统计学意义(均P〈0.05);(4)ABCA1抗体干预可增加THP~1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1蛋白的表达。结论apoA1-ABCA1通路参与泡沫细胞胆固醇逆向转运,apoA1起关键作用,apoA1增加ABCA1蛋白的表达可能与降低ABCA1蛋白的降解有关。

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