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人白介素-10基因转染对大鼠脑缺血再灌注损伤半影区炎性因子基因和蛋白表达的影响

作者:傅军; 张一; 张成生; 杨常春; 王士雷; 林...白细胞介素类基因表达脑缺血再灌注损伤

摘要:目的观察人白介素(IL)-10基因转染对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤半影区肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)基因和蛋白表达的影响。方法建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,采用立体定向脑室内注射的方式进行转染,逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测其转染效果,氯化三苯四氮唑(TTC)染色测定脑梗死体积,荧光实时定量PCR检测半影区TNF-α和IL-1β基因表达情况,ELISA法检测半影区TNF-α和IL-1β蛋白的含量。结果正常对照组、缺血对照组、空质粒组和IL-10基因转染组半影区TNF-α蛋白含量分别为(0.66±0.04)、(1.16±0.26)、(1.15±0.26)ng/g和(0.84±0.05)ng/g,IL-1β蛋白含量分别为(0.37±0.05)、(1.25±0.39)、(1.21±0.58)ng/g和(0.62±0.05)ng/g。与正常对照组比较,其余各组TNF-α和IL-1β蛋白含量明显升高(P〈0.01),而IL-10基因转染组TNF-α和IL-1β含量则较缺血对照组和空质粒组显著降低(P〈0.01);正常对照组、缺血对照组、空质粒组和IL-10基因转染组半影区TNF-α mRNA的表达量分别为1.00±0.53、9.42±1.83、9.69±1.96和3.53±1.09;IL-10 mRNA的表达量分别为1.00±0.51、27.81±4.84、23.96±4.90和13.55±4.45。与正常对照组比较,其余各组TNF-α和IL-1β mRNA表达最明显升高(P〈0.01),而IL-10基因转染组TNF-α和IL-1β mRNA表达量则较缺血对照组和空质粒组显著降低(P〈0.01)。结论人IL-10基因转染后能抑制大鼠局灶脑缺血再灌注损伤半影区TNF-α和IL-1β基因和蛋白的表达,可能是其发挥缺血脑保护作用的机制之一。

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