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肾小管上皮细胞转分化中整合素连接激酶表达及其与衰老的相关研究

作者:洪权; 冯哲; 陈香美; 付博; 张晓洁; 王建...肾小管整合素类细胞外基质

摘要:目的探讨整合素连接激酶(integrjn-linked kinase,ILK)在肾小管上皮细胞转分化过程中的作用及其对衰老进程中细胞外基质(extracellular matrix,ECM)积聚增加的影响.方法分离培养3、24月龄Wistar雄性大鼠的原代肾小管上皮细胞,分别给予0、5、10、20~40μg/L不同浓度的转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)刺激24 h后,用免疫细胞化学或免疫荧光方法检测细胞a SMA、ILK、F-actin表达;Western-blot法检测两组细胞中纤维连接蛋白和ILK的表达水平;体外转录获得大鼠ILK-c RNA探针,检测两组细胞经刺激后ILK mRNA的变化.结果在0浓度TGF-β刺激下,肾小管上皮细胞中ILK和F-actin表达水平24月龄组均比3月龄组高,但两组细胞α-SMA表达水平均很低,且没有差别;随TGF-β刺激浓度的增加,ILK、F-actin和α-SMA表达水平显著上调,其中F-actin与ILK表达增多相一致;FN和ILK蛋白表达水平24月龄组分别为0.438±0.024和0.826±0.051,明显高于3月龄组的0.246±0.018和0.673±0.035(P<0.05).结论随着肾小管上皮细胞转分化程度不断增高,ILK表达增多,并可能通过调节F-actin的重排介导了转分化的过程;随增龄肾小管上皮细胞中ILK和FN表达增多,且F-actin表达随之增多,提示衰老肾脏的肾小管上皮细胞在应激状态下更易于发生转分化。

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