作者：李影; 刘娜; 张维; 顾斌pdlscs经典wnt通路增殖能力成骨能力
摘要：目的：探讨Wnt经典通路β-连环蛋白（β-catenin）过表达对人牙周膜干细胞（periodontal ligament stem cells,PDLSCs）增殖能力及成骨能力的影响。方法：收集因治疗需要拔除的健康前磨牙和第三磨牙8颗,分离、培养PDLSCs。通过构建慢病毒过表达载体,转染β-catenin基因使实验组过表达β-catenin。转染后显微镜下观察常规培养及成骨诱导7d后细胞形态;MTT测定转染前后PDLSCs的增殖情况;实时定量PCR技术检测淋巴增强因子-1（LEF1）、T淋巴细胞因子-4（TCF4）、Runt相关转移因子-2（Runt-related transcription factor 2,Runx2）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、人Ⅰ型胶原蛋白-1（Colossians 1,COL-1）及P38丝裂原活化蛋白激酶（P38mitogen activated protein kinases,P38 MAPK）mRNA表达。成骨诱导7d后,提取RNA,检测成骨相关基因Runx2、ALP、COL-1、P38 MAPK mRNA表达。结果：转染后细胞表达绿色荧光（green fluorescent protein,GFP）。MTT结果示：β-catenin过表达组PDLSCs增殖能力较空转染组增强。β-catenin过表达组LEF1表达水平显著上升（P〈0.05）,TCF4表达水平无显著性差异（P〉0.05）;与空转染组相比β-catenin过表达组成骨诱导7d后Runx2、ALP、COL-1及P38表达水平显著降低（P〈0.05）。结论：经典Wnt/β-catenin通路在PDLSCs增殖及成骨分化过程中发挥重要作用,核心蛋白β-catenin过表达可上调LEF1的表达促进PDLSCs的增殖能力,并可通过下调RUNX2、ALP、COL-1、P38的表达抑制其成骨能力。
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