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不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌对牙龈成纤维细胞基质金属蛋白酶表达的影响

作者:赵蕾; 杨禾; 吴亚菲; 欧阳玉玲; 孟姝紫单胞菌成纤维细胞基质金属蛋白酶类fima基因

摘要:目的观察不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌(Porphyrorrtonaz gingivalis,Pg)对人牙龈成纤维细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)表达水平的影响,探讨fimA基因型与如致病力之间的关系。方法PgATCC33277(I型)、WCSP115(Ⅱ型)、WCSP1.5(Ⅲ型)、W83(Ⅳ型)分别与牙龈成纤维细胞在标准条件下共同孵育(对照组为达尔伯克氏改良伊格尔培养基),于孵育后1、3、6和12h收集细胞和培养上清液,应用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT—PCR)和ELISA法分别检测牙龈成纤维细胞MMP-1、MMP-2的mRNA及蛋白的动态表达。结果与对照组相比,聘刺激下牙龈成纤维细胞MMP-1、MMP-2的mRNA和蛋白水平表达量均明显上调(P〈0.01);其中Ⅱ型fimA型Pg的刺激作用强于其他各型,不同时间点MMP-1mRNA相对表达量及蛋白分泌水平分别为(28.88±3.12)-(231.01±24.99)、(1.35±0.17)-(3.084-1.20);MMP-2mRNA相对表达量及蛋白分泌水平分别为(20.42±2.21)~(188.34±37.37)、(2.57±0.76)~(18.08±1.15),与其他各型相比差异有统计学意义(P〈0.05);III型Pg的刺激作用较弱,不同时间点MMP-1mRNA相对表达量及蛋白分泌水平分别为[(5.11-4-0.55)~(72.84±8.84)]μg/L、[(0.68±0.13)~(1.464-0.94)]μg/L;MMP-2mRNA相对表达量及蛋白分泌水平分别为[(4.554-0.55)~(25.75±3.12)]μg/L、[(2.284-0.93)~(11.22±2.46)]μg/L,与其他各型相比差异有统计学意义(P〈0.05)。结论Pg可以诱导牙龈成纤维细胞过表达MMP,fimA基因型与堍的毒力作用相关,fimA型可能为魄致病力差异的基因基础。

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