作者：杨雪超; 樊明文人牙髓干细胞分离与鉴定成体人牙髓组织体外诱导分化牙本质涎蛋白成牙本质细胞分离培养基因表达单细胞悬液有限稀释法碱性磷酸酶alp活性分化潜能初步探讨第三磨牙年轻患者原代培养细胞克隆扩大培养
摘要：目的从成体人牙髓组织中分离培养牙髓干细胞,初步探讨其分化潜能.方法选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法原代培养.扩大培养细胞克隆,检测STRO-1的表达.体外诱导分化后对各克隆从碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节形成、牙本质涎蛋白(DSP)表达、Oil Red-O染色、PPARr2基因表达等方面进行检测.结果克隆来源细胞STRO-1表达阳性.在矿化液诱导下,克隆细胞呈现明显高的ALP活性;能够形成矿化结节;可以分泌表达DSP,已向成牙本质细胞方向发生了分化.成脂肪诱导后,Oil Red-O染色阳性,可检测到PPARr2基因表达.结论从成体人牙髓组织中可以分离培养出干细胞,在体外能有效增殖并保持低分化状态.
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